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修飾ASP-N蛋白內(nèi)切酶（莓實(shí)假胞菌，突變體

產(chǎn)品型號(hào)：EN-171，2pcs
產(chǎn)品代碼：
產(chǎn)品價(jià)格：
折扣率： 0
最后更新：2017-06-12
關(guān) 注度：5970
生產(chǎn)企業(yè)：深圳市國(guó)泰宜豐科技有限公司

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產(chǎn)品詳細(xì)介紹 修飾ASP-N蛋白內(nèi)切酶（莓實(shí)假胞菌，突變體）ASPARTIC-N

獨(dú)特的修飾方法

   1  最小自分解產(chǎn)物
     （在pH8.0，30°C條件下的自分解小于5%）
   2  改善酶的穩(wěn)定性
       活力保持：
       在30 C, pH 8.0 條件下孵育6小時(shí)，仍保持80-90%活力
       在30 C, pH 8.0 條件下孵育24小時(shí)，仍保持65-75%活力
       Princeton Separations提供測(cè)序級(jí)修飾Asp-N：
   3  在各批次重復(fù)性消化反應(yīng)中，酶活力水平保持一致
   4  高特異性，不受其它已知肽鏈內(nèi)切酶的影響
   5  每一包裝帶有分析證書(shū)以保證質(zhì)量
   6  低水平的自分解防止靶肽模糊不清
   7  24小時(shí)的穩(wěn)定性支持高性能電子噴霧ElectroSpray、微量噴霧MicroSpray、Nanolock噴霧NanoLockSpray等操作的晝夜連續(xù)進(jìn)行。
    Princeton Separations公司測(cè)序級(jí)肽鏈內(nèi)切酶是高度純化的酶，通過(guò)化學(xué)修飾，降低了酶的自裂解，增加了酶的穩(wěn)定性。由于在超長(zhǎng)的消化期間酶持續(xù)保持活性，因此可以極好地控制蛋白裂解反應(yīng)。

特性
Asp-N內(nèi)切蛋白酶是一種金屬酶，從脆假單胞菌的一個(gè)突變種中提出。該酶特異性地水解天冬氨酸和半胱磺酸N-末端的肽鍵，最佳活性反應(yīng)條件在pH6.5-8.0。其分子量為27KD 。
化學(xué)修飾
Princeton Separations測(cè)序級(jí)Asp-N經(jīng)過(guò)充分地純化，去除污染的蛋白酶，避免影響消化的特異性。使用Princeton Separations開(kāi)發(fā)的一種方法將高純度酶制品進(jìn)行化學(xué)修飾。這種修飾使酶呈現(xiàn)出自分解抗性和穩(wěn)定的酶活性。該修飾酶在30°C反應(yīng)緩沖液中孵育6小時(shí)，其活性仍保持至少80-90%的酶活性，在同樣條件下孵育24小時(shí)，仍保持65-75%的活性。蛋白和酶以1:100比率進(jìn)行過(guò)夜消化反應(yīng)，可以完全裂解絕大多數(shù)的蛋白。

質(zhì)量控制
以酪蛋白為底物所進(jìn)行的蛋白消化反應(yīng)用來(lái)檢測(cè)修飾酶的蛋白酶活性。修飾酶蛋白酶活性通常與Trypsin的蛋白酶活性進(jìn)行比較。
制備
每只小瓶裝有修飾Asp-N內(nèi)切蛋白酶干粉3μg，用60μl去離子水或是你所選用的緩沖液溶解，使蛋白酶濃度為0.05μg/μl。
應(yīng)用
對(duì)于蛋白裂解，將酶與蛋白以1：50或1：100比值溶于標(biāo)準(zhǔn)的消化緩沖液（如：50mM Tris-cl，pH8.0；或是50mM磷酸鈉，pH8.0；或是50mM碳酸氫胺）中，25 – 30°C 孵育2-6小時(shí)，如果需要，可延長(zhǎng)到24小時(shí)。過(guò)夜孵育以1：100比值為佳，此反應(yīng)條件適合于大多數(shù)蛋白。
儲(chǔ)存
未開(kāi)包裝儲(chǔ)存于2 – 8°C，去離子水溶解之后，可在-10°C to -20°C儲(chǔ)存3個(gè)月在變性劑尿素中的穩(wěn)定性如果蛋白難于溶解，在消化步驟開(kāi)始之前，可以在消化液中加入尿素。下面表格中所例舉的數(shù)據(jù)，表明變性劑尿素對(duì)修飾Asp-N內(nèi)切蛋白酶酶活性的影響。
尿素濃度    活性控制（%）
     無(wú)            100%
    1.0M         100%
    2.0M         100%
    4.0M         100%
因?yàn)辂}酸胍嚴(yán)重抑制Asp-N的活性，所以不能用其溶解蛋白。

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產(chǎn)品目錄
產(chǎn)品說(shuō)明
EN-171
Aspartic-N   2 x 5 ug vials

深圳市國(guó)泰宜豐科技有限公司

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